細胞支原體是一類無細胞壁的微生物,能夠通過感染細胞而寄生在細胞內或附著在細胞表面。支原體感染通常表現為細胞培養中的污染,這不僅會影響細胞的生長、增殖和代謝,還可能導致實驗結果的失真,因此在細胞培養中進行支原體檢測是至關重要的。為了確保細胞培養的質量,市場上推出了多種用于檢測細胞支原體的試劑盒。

細胞支原體檢測試劑盒的原理:
1.PCR/qPCR技術
PCR技術是基于DNA擴增的原理,通過特異性的引物將支原體的特定基因序列進行擴增,進而檢測支原體的存在。而qPCR技術則是在PCR基礎上加入熒光探針,實時監測DNA擴增的過程。通過分析PCR或qPCR反應的閾值周期(CT值),可以推測樣本中支原體的數量。與傳統的PCR技術相比,qPCR技術不僅能檢測支原體的存在,還能定量分析污染程度。
2.酶聯免疫吸附法
ELISA試劑盒是基于抗原與抗體特異性結合的原理,通過檢測支原體相關抗原或抗體的存在來確認支原體污染。ELISA試劑盒通常包含抗原或抗體涂層的微孔板,樣本中的抗原或抗體與其對應的抗體或抗原反應,產生可通過酶催化反應檢測的顏色變化。
3.DNA探針法
DNA探針法是通過合成與支原體特異性基因序列互補的寡核苷酸探針,這些探針可標記熒光或放射性同位素。當樣本中的支原體DNA與探針結合時,通過檢測熒光或放射性信號來判斷支原體的存在。
細胞支原體檢測試劑盒的應用領域:
1.細胞培養質量監控
在細胞培養過程中,細胞支原體污染是常見問題。細胞培養質量的保證要求對細胞樣本進行定期監測,特別是在藥物篩選、基因表達、蛋白質研究等關鍵實驗中,支原體污染會導致研究數據的不準確。因此,支原體檢測試劑盒被廣泛用于細胞培養質量的控制。
2.生物制藥行業
生物制藥領域中的細胞培養過程非常精細,任何支原體污染都可能導致藥物生產失敗或質量問題。使用支原體檢測試劑盒能夠確保藥物生產過程中的細胞培養不受到污染,從而保證藥品的質量和安全性。
3.醫學研究與臨床實驗
在醫學研究中,細胞支原體污染可能影響基因功能研究、癌癥研究等領域的數據準確性。尤其是在臨床實驗中,準確的支原體檢測對于研究結果的可靠性至關重要。
4.質量保證與認證
許多生物實驗室、科研機構以及制藥公司都需要進行細胞支原體的定期檢測,以符合GMP(良好生產規范)或GLP(良好實驗室規范)等質量標準。為這些機構提供了便捷、可靠的檢測手段。